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Doctor en Literatura Comparada por la Universidad de Harvard. Ostenta el cargo de catedrático de Literatura Comparada en las universidades de San Diego, California, Princenton, y de Harvard entre 1978 y 1985. Actualmente es profesor emérito de la Universidad de Harvard, de la Universidad Autónoma de Barcelona y de la Universidad Pompeu Fabra. Salió de España hacia un largo exilio muy joven, en 1939, junto a su padre, el poeta Jorge Guillén, quien despertó su interés por la literatura y la poesía. Dedicado a la docencia, que ejerció en las universidades americanas mencionadas, regresó a España en 1982. En este mismo año fue nombrado por la Universidad Autónoma de Barcelona catedrático extraordinario de la asignatura Literatura Comparada, ámbito en el que es considerado un gran especialista y pionero en España. Autor de trabajos relativos a la materia que siempre impulsó, la Literatura Comparada, Guillén se dedicó también al mundo editorial para dirigir las colecciones "Clásicos Alfaguara", "Escritores de América" y "La Biblioteca de Literatura Universal" de Espasa Calpe. Asimismo asumió la edición crítica de la obra De Garcilaso a Lorca, de Francisco García Lorca. Fue presidente, entre 1984 a 1989, de la Sociedad Española de Literatura General y Comparada, y actualmente es miembro de la Sociedad Internacional de Literatura Comparada y de la Comisión Asesora de la Fundación Juan March. El 23 de marzo de 2002 fue elegido académico de la Real Academia Española, para ocupar el sillón "m".

Ha escrito los siguientes libros: Los pleitos extremeños de Mateo Alemán: I El Juez, "Dios de la tierra" (1960), The anatomies of roguery a comparative study in the origins and the nature of picaresque literature (1967), Literatura as system: essays toward the theory of literary history... (1971), Entre lo uno y lo diverso: introducción a la literatura comparada (1985), El Primer Siglo de Oro: estudios sobre géneros y modelos (1988), Teoría de la historia literaria (1989), La expresión total: notas sobre literatura y obscenidad (1993), El sol de los desterrados (1995), Europa, ciencia e inconsciencia (1997), Múltiples moradas (1998) y Entre el saber y el conocer: moradas del estudio literario (2001).